高靈敏·全預(yù)混·可凍干助力多重pcr熔解曲線技術(shù)！
病原體分型檢測、病原體靶標(biāo)多重檢測以及耐藥基因檢測等檢測方法，能夠為精準(zhǔn)風(fēng)險分層、指導(dǎo)臨床干預(yù)、優(yōu)化篩查效率提供相應(yīng)的臨床依據(jù)。其中 HPV分型檢測聯(lián)合宮頸細(xì)胞學(xué)檢查(如TCT) 更是成為宮頸癌防治的金標(biāo)準(zhǔn)工具。
呼吸道病原體感染的臨床癥狀重疊度高，導(dǎo)致病原體鑒定周期長、操作復(fù)雜，使臨床對多重核酸檢測技術(shù)的需求愈發(fā)迫切。
多色熒光熔解曲線分析技術(shù) (Multiplex Fluorescence Melt Curve Analysis , FMCA/MMCA) 是基于熒光PCR熔解曲線平臺，采用雙標(biāo)記、自淬滅的TaqMan探針或分子信標(biāo)，利用靶標(biāo)序列與探針匹配的堿基數(shù)/堿基序列不同，獲得不同的熔解溫度Tm值，從而實現(xiàn)多基因、多位點(diǎn)的并行性檢測，進(jìn)行已知多病原體檢測、基因分型以及突變檢測的技術(shù)。
寶銳生物新推出產(chǎn)品M3291利用不對稱擴(kuò)增熔解曲線技術(shù)，采用無5’-3’外切酶活性的DNA聚合酶，避免探針?biāo)?，提高檢測靈敏度，實現(xiàn)單管多重檢測目的，有效助力病原體檢測、耐藥基因檢測、生殖遺傳篩查、食品安全檢測等。
靈敏度測試
圖1：HPV 1×103copies/μL擴(kuò)增檢測 圖2：HPV 10 copies/μL擴(kuò)增檢測
表1 HPV 16重多色熔解曲線靶標(biāo)信息
結(jié) 論
寶銳M3291對HPV 10copies/μL樣本可進(jìn)行準(zhǔn)確分型檢測。
穩(wěn)定性測試-試劑穩(wěn)定性
圖3：即時擴(kuò)增效果 圖4：預(yù)混液37℃加速14d擴(kuò)增效果
結(jié) 論
寶銳M3291試劑可實現(xiàn)多靶標(biāo)單管檢測，且預(yù)混液37℃加速14d性能穩(wěn)定。
穩(wěn)定性測試-2-8℃全預(yù)混穩(wěn)定性
圖5：液體試劑即時擴(kuò)增效果 圖6：液體試劑2-8℃放置7d擴(kuò)增效果
結(jié) 論
寶銳M3291含引物探針配制成單管全預(yù)混試劑后，2-8℃放置7d，擴(kuò)增性能穩(wěn)定。
凍干穩(wěn)定性測試
圖7：液體試劑即時擴(kuò)增效果 圖8：凍干試劑55℃加速30d擴(kuò)增效果
結(jié) 論
寶銳FM0301制備為凍干粉后，55℃ 1M后，整體基本穩(wěn)定。
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