環(huán)狀 RNA (Circular RNA,circRNA)是一種通過典型的5'-3'磷酸二酯鍵形成的環(huán)形結構的 RNA 分子。相比于線性 RNA,circRNA 不包含 5'端帽結構和 3'端 poly(A),缺乏游離未端,不易被核酸外切酶降解,比線性 RNA 更穩(wěn)定。目前常用體外轉錄制備環(huán)狀 RNA 的方法主要是通過先體外生成線性 RNA,然后通過酶法連接環(huán)化、內(nèi)含子自剪切核酶切割連接環(huán)化。寶銳生物開發(fā)出一種操作簡單制備環(huán)狀 RNA 的試劑盒,環(huán)狀 RNA 制備試劑盒進行環(huán)化的原理是,在 GTP 和 Mg2+存在的條件下,環(huán)狀 RNA 前體分子能通過雙酯交換反應實現(xiàn)自動環(huán)化,本試劑盒操作僅需一步孵育即可完成,因此環(huán)化產(chǎn)物不需要進行純化,可直接用于后續(xù)實驗。
本試劑盒提供的環(huán)化反應體系可以按照比例放大反應體系,對環(huán)狀 RNA 產(chǎn)物的得率無顯著影響。
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