在真核生物中轉(zhuǎn)錄后修飾形成的成熟 mRNA的 5'端都有一個(gè)特殊結(jié)構(gòu),即 m7GPPPN 結(jié)構(gòu),又稱為甲基鳥苷帽子。帽子結(jié)構(gòu)作為 mRNA 翻譯起始的必要結(jié)構(gòu)不僅可以保護(hù) mRNA不被 RNase切割,延長半衰期,還能提高 mRNA 在翻譯、剪接以及從細(xì)胞核導(dǎo)出等環(huán)節(jié)中的穩(wěn)定性。寶銳生物自主研發(fā)的牛痘病毒加帽酶(Vaccinia Capping Enzyme,VCE)整合了mRNA三磷酸酯酶、鳥苷?;D(zhuǎn)移酶和鳥嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶等加帽酶必要活性,在 S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作為甲基供體和鳥苷三磷酸(GTP)存在的情況下,它可以直接高效地將 m7G 帽結(jié)構(gòu)按照正確的方向加到 mRNA 的 5'端,生產(chǎn)帶有 Cap0 帽 結(jié)構(gòu)的RNA,單次反應(yīng)最高可實(shí)現(xiàn)100%的加帽率。搭配寶銳生物的二氧甲基轉(zhuǎn)移酶(2'-O-Methyltransferase,2OM) (BP-E06)可獲得帶有 Cap1 帽結(jié)構(gòu)的 RNA。
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